國內關于羊肚菌人工馴化栽培的最早記錄是1983年（顧云龍 1983）。

　　在1883年《中國食用菌》雜志的第二期上，顧云龍發(fā)表了其對黑脈羊肚菌的引種馴化研究。

　　顧龍云（1983）對甘南、臨潭、洮河林區(qū)的野生羊肚菌調研發(fā)現(xiàn)，黑脈羊肚菌（M.angusticeps）子實體在云、冷杉林山谷伐木滑道下生長得最多，其中有的菌絲休在枯枝落葉層下腐殖質中的腐木上生長發(fā)育，當溫、濕度適宜時便形成子實體。

　　作者隨后對其進行了孢子分離和栽培實驗，其中孢子分離方法為懸掛孢子彈射法（圖1~2 所示）。具體做法是：將羊肚菌子實休切棄帶泥的菌柄基部，用無菌水沖洗數(shù)次后置無菌箱內的無菌燒杯中。接下來的操作均以無菌操作規(guī)范進行：首先用75%的酒精棉球對羊肚菌子實體進行表面消毒，用鐵絲彎鉤掛住菌柄基部，將子實體倒掛在三角瓶中，使羊肚菌菌蓋的最低端距瓶底培養(yǎng)基表面2 ~ 3 cm，塞上棉塞，置于16 ~ 18℃，并用 40 W日光燈照射，24 h左右，即可見到像一陣煙霧似的子囊孢子散落在培養(yǎng)基上（注：即便看不到彈射的孢子也沒關系）。隨后，在無菌條件下丟棄子實體，將三角瓶置于20℃恒溫培養(yǎng)，待孢子萌發(fā)形成菌落后進行純化、轉管操作，并鏡檢獲得的羊肚菌純菌種。

　　

　　圖1懸掛法進行孢子彈射分離（顧龍云1983） 

　　顧龍云（1983）所進行的孢子萌發(fā)和轉管所用的培養(yǎng)基分兩種，其中1號培養(yǎng)基為：腐殖質土浸出液300 mL（菇木周圍的土200 g加水500 mL煮沸過濾）、菇木浸出掖液100 mL（菇木50 g、加水300 mL煮沸過濾）、子實體浸出液100 mL（子實體25 g、加水300 mL煮沸過濾）、葡萄糖5 g、磷酸二氫鉀0.5 g、硫酸鎂0.5 g、尿素0.5 g、石膏粉1 g、瓊脂10 g，加水至500 mL；2號培養(yǎng)基以1號培養(yǎng)基中不添加子實體浸出液，其他成分相同；培養(yǎng)基pH 7.2 ~ 7.5之間，滅菌后備用。作者指出，20℃培育，1號培養(yǎng)基菌絲生長較快，菌絲整體整齊、濃密、粗壯，7 ~ 10 d可長滿斜面，2號培養(yǎng)基生長較慢，菌絲參差不齊、稀疏、細弱，10 ~ 14 d長滿斜面。

　　顧云龍所進行的栽培實驗以櫟木屑75%、麩皮15%、腐殖質土5%、過磷酸鈣0.4%、葡萄糖1%、硫酸銨0.5%、磷酸二氫鉀0.05%、硫酸鎂0.05%、尿素1%、石膏粉1%為主，并以添加或不添加1%的羊肚菌子實體碎粉作為可選項進行裝瓶、滅菌，接種、養(yǎng)菌完成后，進行催菇處理（保持空氣濕度80% ~ 85%，散射光照射）。最終發(fā)現(xiàn)，在添加有1%子實體碎粉的培養(yǎng)基上，16 ~ 20℃條件下，35 d可長滿全瓶，55 d出現(xiàn)珊瑚型綠豆大的子實體原基，繼續(xù)培養(yǎng)至65 d，原基不再進一步分化，在未添加羊肚菌子實體碎粉的固體培養(yǎng)基上，菌絲生長慢，45 d僅生長到全瓶的1 / 2 , 繼續(xù)培養(yǎng)至65 d，未形成原基。 

　　雖然作者（顧龍云1983）指出，55 d的培育獲得珊瑚型綠豆大的羊肚菌子實體原基，但最終未能獲得成熟的羊肚菌子實體。從全文來看，雖然作者也對獲得菌絲物進行鏡檢，指出菌絲有分隔，無鎖狀聯(lián)合，但作者并未記錄菌絲的顏色變化、菌核等羊肚菌的其他典型特征，加之20℃的試管種和瓶栽培養(yǎng)時間均明顯長于正常的羊肚菌生長速度（編者注：PDA或CYM培養(yǎng)基，20 ~ 23℃培育，180×18 mm試管，平均4 ~ 6 d即可長滿，6 ~ 9 d可形成菌核；750 mL原種瓶，20 ~ 23℃培育，20 ~ 25 d即可完全長滿）；且從培養(yǎng)基組成來看，作者使用的培養(yǎng)基營養(yǎng)均比較豐富，這不是菌絲生長緩慢的原因所在，因此，這里我們無法對作者獲得的羊肚菌菌種純度進行判別。作者進行的瓶栽實驗思路和常規(guī)的食用菌如金針菇、杏鮑菇等瓶栽相似，屬于早期的仿生栽培理念。雖然作者指出獲得珊瑚狀原基，但缺乏對其獲得的原基的詳細描述，也無法判定，其是否為真正的羊肚菌原基。（未完待續(xù)）

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