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    靈芝細胞中異源表達透明顫菌血紅蛋白基因提高胞外多糖的產量


    【發布日期】:2019-01-26  【來源】:食用菌學報
    【作者】劉柯 李煥軍 張德懷 岳同輝 李娜 徐軍偉
    【機構】昆明理工大學生命科學與技術學院 昆明理工大學理學院
    摘要:在靈芝(Ganoderma lingzhi)中異源表達透明顫菌血紅蛋白(Vitreoscilla hemoglobin,VHb)基因,采用一氧化碳差異波譜分析的方法檢測轉基因菌株的生物活性,并對野生型菌株和工程菌株進行發酵,通過熒光定量PCR對靈芝多糖生物合成途徑上的葡萄糖磷酸變位酶(α-phosphoglucomutase,PGM)、尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(uridinediphosphate glucose pyrophosphorylase,UGP)和β-1,3-葡聚糖合酶(β-1,3-glucan synthase,GLS)3個基因的轉錄水平進行分析。研究表明:透明顫菌血紅蛋白基因(Vitreoscilla hemoglobin gene,vgb)在靈芝中能夠成功表達,并且具有生物活性;工程菌株中胞外多糖的最高產量達0.83g/L,比野生型菌株提高了88.6%;與野生型菌株相比,工程菌株中多糖生物合成途徑上PGM、UGP和GLS基因的相對表達量分別是1.52、1.55和3.85。異源表達透明顫菌血紅蛋白基因是提高靈芝胞外多糖產量的一種有效方法。 
    基金:國家自然科學基金項目(31360495和21566016)資助;
    關鍵詞:靈芝; 葡萄糖磷酸變位酶; 尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶;
     
     
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