【作者】劉璐；高原；杜雙田；田夢媛；耿緣；

【機構】西北農林科技大學生命科學學院；

【摘要】以香菇菌株YJ-01為試材,以原生質體產量與再生率為指標,探究酶種類、酶解時間、酶解溫度、pH、穩滲劑種類、穩滲劑濃度及菌絲菌齡等7個因素對原生質體產量與再生率的影響。通過單因素試驗,選出了4個因素（酶解溫度、酶解時間、菌齡和穩滲劑濃度）利用四因素二次通用旋轉設計進行優化。結果表明:（1）YJ-01原生質體最佳制備條件:pH 5.0,0.5 mol/L MgSO4溶液作穩滲劑,對5日齡菌絲體于28℃條件下酶解3 h。各因素對原生質體產量的影響作用依次為酶解溫度>酶解時間>菌齡>穩滲劑濃度。（2）YJ-01原生質體最佳再生條件為,當p H 5.5,以0.5 mol/L蔗糖溶液作穩滲劑,對6.5日齡菌絲體在27.8℃酶解2.9 h。各因素對原生質體再生率的影響作用依次:穩滲劑濃度>酶解時間>菌齡>酶解溫度。 

【關鍵詞】香菇; 原生質體制備; 原生質體再生;