【作者】吳茵 陳敏 郭倩

【機(jī)構(gòu)】浙江工商大學(xué)食品與生物工程學(xué)院

【摘要】分離純化刺芹側(cè)耳Pleurotus eryngii芳基醇氧化酶,并探究其酶學(xué)性質(zhì)。通過硫酸銨鹽沉、DEAE-Sepharose Fast Flow弱陰離子交換層析、Sephacryl S-200 High Resolution凝膠過濾層析和Source 15Q強(qiáng)陰離子交換層析,得到純化的單一酶。經(jīng)肽指紋圖譜鑒定,確定其為芳基醇氧化酶,酶活回收率25.5%,純化倍數(shù)38.2。結(jié)合SDS-PAGE和IEF-PAGE分析,確定其分子量和等電點(diǎn)分別為70k Da和4.2。以藜蘆醇為底物,該酶最適反應(yīng)p H為6.0,最適反應(yīng)溫度為70℃,金屬離子Zn2+、Fe2+和Cu2+對芳基醇氧化酶的活性抑制作用明顯,Km和Vmax分別為0.921mmol/L和80U/mg。 

【基金】浙江省科技廳專項(2014C33027)~~；

【關(guān)鍵詞】刺芹側(cè)耳; 芳基醇氧化酶; 柱層析; 藜蘆醇;