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    金針菇產植酸酶菌株的篩選及植酸酶基因區域的克隆


    【發布日期】:2010-05-17

    劉世強; 郭麗瓊; 林俊芳; 郭安平
    中國熱帶農業科學院熱帶作物生物技術國家重點實驗室; 中國熱帶農業科學院熱帶作物生物技術國家重點實驗室; 中國熱帶農業科學院熱帶作物生物技術國家重點實驗室; 中國熱帶農業科學院熱帶作物生物技術國家重點實驗室 ???71701 ; 海口571701; 華南農業大學食品學院生物工程系; 廣州510640 ; ???71701; 華南農業大學食品學院生物工程系; 廣州510640 ; ???71701

    【中文摘要】 從金針菇(Flammulina velutipes)7個菌株中篩選出1株高產植酸酶菌株。根據GenBank中植酸酶基因的保守區設計并合成一對特異性引物,以金針菇菌絲的總DNA為模板,通過PCR擴增,獲得了一條長約790bp的片段。DNA序列測定結果表明,該片段長度為788bp,采用Blast軟件進行序列比對發現,該片段與平田頭菇(Agrocybe pediades)的植酸酶基因phy(GenBankAccession:CAC48160)編碼的氨基酸具有64%的序列同源性。該片段含有2個內含子,含有植酸酶基因的活性位點高度保守序列(Active-site sequence)-RHGXRXPT[1]。

    【英文摘要】 One Flammulina velutipes strain producing high yield of phytase was screened from seven Flammulina velutipes strains.The phytase gene region was cloned by PCR amplification from Flammulina velutipes genomic DNA with a pair of specific primers designed according to the conserved sequence of phytase genes in the GenBank.DNA sequencing determination results showed that the fragment length was 788bp.Sequence analysis with Blast software indicated that the deduced amino acid sequence was 64% of homology with the amino acid sequence of phytase gene phy(GenBank Accession:CAC48160) from Agrocybe pediades.The fragment contained two introns and the active-site high-degree conserved sequence of phytase genes-RHGXRXPT.

    【中文關鍵詞】 金針菇; 植酸酶; 篩選; 克隆
    【英文關鍵詞】 Flammulina velutipes; Phytase; Screen; Clone
    【基金】國家自然科學基金資助項目“草菇冷凍脅迫誘導表達基因及其啟動子的克隆分離”(編號:30060054);; “食用菌外源基因表達系統的建立”(編號:30371000)的部分研究內容

    【文獻出處】 食用菌學報,Acta Edulis Fungi,編輯部郵箱,2005年03期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2005-03-000

     
     
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