在長期的食用菌研發工作中,筆者及廣大菇農朋友深切地感受到這樣一個現實問題:即每當一個新品種(菌株)選育成功,應用于生產后,少則一二年,多則五六年即已“退化”,輕則表現發菌慢、產量低,重則表現為抗性差、發病率高。如何能抑制菌株的“退化”速度、還菌種自身原來的生物學特性、恢復其生產性狀呢?經過對脫毒土豆、脫毒地瓜以及脫毒花卉的生產效果考察以及方法的類比,根據食用菌菌種的生產規律及其特殊性,設計并進行了“食用菌菌種脫毒”的研究,脫毒菌種經在十幾處食用菌生產基地的廣泛中試,證明效果良好,可以進行產業化推廣。
一、菌種脫毒的技術程序
1、菌種脫毒的設計原理。
所謂菌種脫毒,就是采用先進的尖端分離技術、配合對成熟菌絲體不同階段不同形態自然生成物的分離技術以及選用不同基質使接入種有條件進行選擇性生長,并經2~4個循環后,使該菌種徹底擺脫原攜病毒、病菌,恢復其原本生物特性。根據該定義,研究采用了液體基質→秸稈基質→液體基質→秸稈基質的設計,根據品種的不同,反復2~4次循環,并有意令培養基處于不穩定即所謂富養――貧瘠的交替條件下,通過一系列往復操作,使菌種在“脫”掉原攜病毒病菌的前提下,自然恢復和產生較強抗性,從而達到脫毒后的菌種具有較原菌種抗逆、抗病等性狀更強的生產性狀的目的。
2、菌種脫毒的技術過程。
菌種脫毒的操作本身并不復雜,但需花費較長時間,并需嚴格控制脫毒時機和操作,主要過程及要求為:
(1)必須按照“綠色食用菌”的技術要求配制培養基。首先,在進行組織分離及尖端分離時,配制的斜面及平板培養基,應當較常規生產用配方的營養相對貧乏一些,基本配方為:土豆150克,木屑30克,蔗糖15克,瓊脂粉10克。其次,在轉接秸稈(或棉殼)基質時,該培養基可常規操作,基本配方為:棉殼1250克,麥麩125克,木屑250克,石膏粉250克,尿素7克,水2200克。上述培養基營養相對貧乏,食用菌菌絲較難發展,但某些病菌也很難發展,但在該種條件下,相對而言,食用菌菌絲較有生長優勢,待再次進行分離操作時,利用菌絲尖端遠離病菌、病毒的條件將其“甩”在原基質中而避免重新帶入新的培養環境中,從而達到逐步脫毒的目的。
(2)常溫培養,并創造相對不適宜的溫度等條件,利用食用菌的生長優勢,達到脫毒的目的。一般情況下,可采取偏低溫度的條件,使食用菌菌絲能夠緩慢生長,但某些病毒、病菌無法萌動;但在具體脫毒操作過程中,可根據菌種的品種特性及實際條件實施操作;比如金針菇菌種的脫毒,由于金針菇屬低溫菌,其子實體在15℃以上條件時即表現較差,相應某些病菌病毒也易在較低溫度時對其形成侵染,故在初次脫毒分離時,應將培養溫度調控至25℃~30℃,轉接時再調至15℃以下;第二循環分離脫毒時,繼續維持15℃以下的條件,但在轉接時則需重新調至25~30℃;第三循環分離脫毒時,仍維持25℃~30℃,轉接后則降至15℃以下條件進行培養;如此經高――低――低――高――高――低的較大溫差,造成了使病菌、病毒難以適應的溫度條件,從而達到脫毒之目的。但在一般平菇菌種的脫毒操作中,考慮一般生產者無法對溫度實施調控,故可進行常溫培養,只要操作認真、細心,并注意觀察和取舍,均可實現脫毒目的。
(3)菌種脫毒采用的是“尖端”脫毒理論,因此,應適時、及時地進行分離操作,否則,一旦超過時限,病菌病毒便會“跟蹤前進”,使脫毒工作前功盡棄。所謂尖端分離技術,即以菌絲體生長的最末梢或子實體的末梢組織為分離物體進行的分離操作,其基本根據是:隨著生物體內細胞的不斷分裂,生物體自身才能不斷膨大,即不斷生長,其末梢組織屬于新生組織的“前沿地帶”,理論上認為,該組織與生物體自身攜帶的病菌病毒之間的距離較大,故脫毒效果較為理想。一旦某環節無故延長時間,則很難保證脫毒效果。
(4)脫毒操作需連續進行,中間不得有停頓、保存等過程。如前所述,菌種脫毒是在分離――再分離的操作中實現的,但其生物體的培養,則是在不同基質(不同級別)的相互轉換過程中實現的,如培養皿或試管菌種轉入菌瓶,由菌瓶再轉入培養皿或試管等。該過程應連續操作,期間應安排好工作程序,如果因時間或其它條件無法完成本次操作,或將某級生物體進行冰箱保存時,則難以達到脫毒目的。
二、脫毒菌種的生產優勢及其發展前景
1、菌種脫毒后,恢復其原有生物學特性,無論在品種推廣還是在菇農生產中,脫毒菌種將徹底保持品種的“清白”。如過去個別單位在推介品種時大力宣傳是“黑蘑菇”,而菇農卻種出了“白蘑菇”,這其中排除“人為操作”原因外,與菌種帶菌帶毒進入生產環節的關系很大,而經脫毒后的菌種,永遠不會發生上述事情。
2、菌種脫毒后,抗逆性明顯增強。包括對溫度、濕度等外界環境條件的抗性,以及以某些人為因素如通風不及時、通風量不足等不良生長條件的抗性等,抗逆性增強的重要標志是:在相對管理比較粗放的情況下“照樣長出好蘑菇(菇農語)”,這是對脫毒菌種的真實寫照。
3、脫毒菌種的抗病性提高,是受廣大菇農朋友喜歡的主要原因。據2002年初步統計,在重點推廣的品種中,脫毒菌種較常規菌種的發病率降低60%以上。在去年秋冬季節至今年春季的栽培生產中,濟南、聊城、德州、濰坊、菏澤等地菇農凡是使用脫毒菌種的生產,黃斑病、褐斑病、褐腐病等病害幾無發生。
4、2002年度生產,山東等地食用菌病害呈大面積發展趨勢,給菇農造成很大損失。據分析,各種原因除栽培環境、病害預防、品種選擇不當外,菌種自揣攜帶病菌、病毒、抗性差是主要原因,在做好其它工作的基礎上,對所有菌種進行脫毒處理,是至關重要的。從已推廣和中試的情況來看,菌種脫毒是食用菌產業化發展中必不可少的關鍵一環,脫毒菌種是食用菌產業化發展的必備條件之一,因此建議:
――供種單位應迅速開展食用菌菌種的脫毒工作,使脫毒菌種盡快全面應用于生產。
――廣大菇農朋友應從理論上認識脫毒菌種的重要性,從實踐中了解脫毒菌種對生產的促進和提高作用。不要以為是“相同模樣”的菌種就盲目引進,這只是表面現象,關鍵是要了解菌種的內在品質;菌種脫毒與否,直接關系到栽培生產的效益如何,甚至關系到生產的成功與否。
形成批量生產、菌種自制自用的菇農朋友,應盡快掌握菌種脫毒技術,并盡快應用于生產。因為這部分生產戶,在當地有一定影響力,他們的成敗,對周圍菇農及其他農民的影響較大,具有相應的示范帶頭作用。
主要脫毒品種重點推介品種類別 菌株名稱 出菇溫度生物性狀
平菇
脫毒119 4~32 深灰或黑色,光澤油亮,疊狀朵形,轉潮快,抗病強
脫毒農科12 4~27 深灰或黑色,光亮,朵大形美,轉潮快,抗雜抗病強
脫毒佛羅里達 4~35 白色品種,冬季土褐色,朵大形美,難分潮次,特抗病
脫毒高溫1號 15~37 白色品種,朵形適中,光澤好,抗高溫、抗病、抗雜
脫毒黑霸王 4~25 灰色至灰黑,光澤好,朵形適中,轉潮快,抗病強
脫毒漢口3號 4~28 灰色或灰黑色,葉片厚大,朵形大,轉潮快,抗病強
草菇 脫毒農科V42 26~36 野生分離脫毒種,特抗雜、抗病,包被厚,開傘慢
脫毒V35 26~35 國內當家種,脫毒后更顯其高抗性,高產、開傘慢
雞腿菇 脫毒雞腿菇2000 8~30 白色種,鱗片少,出菇整齊,開傘慢,主要出口種
脫毒農科833 8~30 野生分離脫毒白色種,個頭適中,出菇整齊,開傘慢
白靈菇 脫毒白靈菇 8~22 大型純白色、掌形品種,單株可達800克, 后熟期短
杏鮑菇 脫毒杏鮑菇 8~26 保齡球形生物效率60%;柱狀為100%, 產量明顯提高
阿魏菇 脫毒阿魏菇 8~25 白色菌柄,粗壯肥碩,生物效率100%, 高產性明顯
雙孢菇 脫毒雙孢2796 8~25 抗雜抗病性提高,個頭均勻,轉潮快,不開傘,耐高溫