提取香菇DNA的LETS改進法

The Modified LETS Method for the Extraction of DNA from Lentinula edodes Fruitbody

尚曉冬　 曹暉　 譚琦

摘　要：用改進的LETS法提取香菇子實體DNA,就是在香菇子實體勻漿中加入等體積的苯酚∶氯仿∶異戊醇混合液前,于勻漿液中加入0.25體積的無水乙醇和0.11體積的5mol/L醋酸鉀溶液,能顯著提高所提取DNA的溶解性.

關鍵詞：改進的LETS法;香菇;DNA溶解性

分類號：S646.120.1　文獻標識碼：A

文章編號：1005-9873(2005)01-0019-03

基金項目：上海市科委標準化專項"食用菌品種區別性檢測技術研究"(項目編號:04DZ05004)的部分內容

作者簡介：尚曉冬(1973-),男,1999年畢業于南京農業大學植保系,碩士,助研,主要從事食用菌遺傳研究,發表主筆論文3篇.

作者單位：尚曉冬（農業部食用菌產品質量監督檢驗測試中心(上海);農業部食用菌遺傳育種重點開放實驗室;上海市農業遺傳育種重點實驗室;上海市農業科學院食用菌研究所,上海,201106）　

　　　　　曹暉（農業部食用菌產品質量監督檢驗測試中心(上海);農業部食用菌遺傳育種重點開放實驗室;上海市農業遺傳育種重點實驗室;上海市農業科學院食用菌研究所,上海,201106）　

　　　　　譚琦（農業部食用菌產品質量監督檢驗測試中心(上海);農業部食用菌遺傳育種重點開放實驗室;上海市農業遺傳育種重點實驗室;上海市農業科學院食用菌研究所,上海,201106）　

參考文獻：

［1］譚琦,Romaine CP.利用RAPD技術對不同地區的有害疣孢霉菌株進行遺傳分析[J].食用菌學報,1996,3(4): 52～56.

［2］譚琦.用RAPD技術對香菇非對稱雜交后代遺傳性狀的分析[J].食用菌學報,2001,8(1): 10～14.

［3］王淑珍,白晨,范俊,等.靈芝與糙皮側耳原生質體融合子基因組RAPD分析[J].食用菌學報,2003,10(1): 1～5.

［4］Lewinsohn E,Steele CL,Croteau R.Simple isolation of functional RNA from woody stems of gymnosperms[J].Plant Mol Biol Rept,1994,12: 20～25.

［5］Tesniere C,Vayda ME.Method for the isolation of high-quality RNA from grape berry tissues without contaminating tannins or carbohydrates[J].Plant Mol Biol Rept,1991,9: 242～251.

［6］Su X,Gibor A.A method for RNA isolation from marine macro-algae[J].Anal Biochem,1988,174:650～657.

［7］Bahloul M,Burkard G.An improved method for the isolation of total RNA from spruce tissues[J].Plant Mol Biol Rept,1993,11: 212～215.

［8］Fang G,Hammar S,Grumet R.A quick and inexpensive method for removing polysaccharides from plant genomic DNA[J].Bio Techniques,1992,13: 52～56.

［9］秦蓮花,張紅,陳明杰,等.微衛星(TATG)n基序在香菇菌種中的驗證[J].微生物學報,2004,44(4):474～478.

食用菌學報

ACTA EDULIS FUNGI

2005 Vol.12 No.1 P.19-21