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    糙皮側耳乙醛脫氫酶基因PoALDH1的克隆與非生物脅迫下的表達分析


    【發(fā)布日期】:2019-01-24  【來源】:菌物學報
    【作者】戚元成劉元棟孫憲凱張夢珂張倩文晴邱立友申進文
    【機構】河南農業(yè)大學生命科學學院
    摘要:本研究從糙皮側耳中克隆了乙醛脫氫酶基因PoALDH1(Gen Bank登錄號為KT026035)和其全長c DNA序列。長為2 016bp的PoALDH1序列編碼478個氨基酸,分子量約為52k Da,氨基酸序列中含有乙醛脫氫酶保守的谷氨酸活性位點和半胱氨酸殘基活性位點。PoALDH1基因在大腸桿菌中表達后顯示,重組菌株的乙醛脫氫酶比活力為0.58U/mg,且重組菌株的乙醛耐受性顯著高于對照菌株。實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR)分析PoALDH1基因在糙皮側耳不同發(fā)育時期的表達結果顯示,PoALDH1基因在原基期的表達量約為雙核菌絲期的5倍。PoALDH1基因在原基發(fā)育起始階段經光照及溫差刺激后均上調表達。當糙皮側耳菌絲暴露在不同濃度的氯化鈉及甘露醇的條件下時,菌絲生長均受到抑制且PoALDH1基因的表達量均高于對照。研究結果將為進一步從分子水平揭示糙皮側耳的抗逆機制以及食用菌的發(fā)育奠定一定基礎。 
     
    基金:現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系建設專項(CARS-24); 河南省重點科技攻關項目(162102110091)~~;
     
    關鍵詞:糙皮側耳; 乙醛脫氫酶基因; 非生物脅迫; 原基形成;
     
     
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