【作者】方衛國 張永軍 馬金成 肖月華 楊星勇 裴炎

【機構】西南農業大學生物技術中心西南農業大學生物技術中心 重慶400716

【摘要】擴增與已知序列相連的未知序列是一項常用的分子生物學技術。與其它方法相比,目前在棉花上應用的YADE法具有效率高,成本低和假陽性低等特點。因此,作者嘗試將該法引入到昆蟲病原真菌的分子生物學研究,并取得了成功,建立了適合于球孢白僵菌和金龜子綠僵菌的YADE的技術體系。類枯草桿菌蛋白酶在昆蟲病原真菌穿透寄主體壁時起重要作用,作者在已克隆的球孢白僵菌類蛋白酶基因CDEP-1的基礎上,利用YADE法,克隆類球孢白僵菌類枯草桿菌蛋白酶基因CDEP-1的啟動子CDEPP。序列分析發現:CDEPP中沒有明顯的TATA和CAAT框,含有8個可能的碳調控因子的結合位點5’>(g/c)YggRg<3’和2個氮調控因子的結合位點——相隔很近的GATA。這與CDEP-1的表達受碳/氮抑制的結果一致。本文的結果將會為研究CDEP-1的表達規律奠定基礎。 

【基金】國家自然科學基金資助項目(批準號:30200183)； 國家高技術研究發展計劃(863)資助項目(批準號:2001AA214051)；

【關鍵詞】昆蟲病原真菌; PCR步移; 體壁降解酶; 上游調控序列;