3.滅菌與接種
　　將裝好的菌袋置滅菌鍋內進行消毒滅菌，滅菌時間可根據鍋內容積大小與裝料多少而定，一般常壓蒸氣滅菌100℃持續6～8小時，然后取出放在冷卻室內，待料溫降至20℃左右時接種。接種時選用菌絲潔白、健壯、生長旺盛、無雜菌污染的菌種，在無菌室或接種箱內，嚴格按照無菌操作規程進行接種，整套程序要求嚴密迅速，以防雜菌侵入。接種時先將原種(二級擴大種)瓶口打開，以酒精燈火焰封口，然后再將栽培袋口解開，用接種鉤迅速取出原種接入栽培袋內，每袋接種量約為25～50g，接完種后，在袋口塞一棉團，松緊適宜，扎好袋口，有利通用供氧，促進猴頭菌絲健壯生長。
　　4.栽培與管理
　　接種后將栽培袋移進栽培室，排放于地面或角鐵層架上，室溫以控制在25～30℃為宜，約30～35天，菌絲即可長滿菌袋，低于12℃生長緩慢，高于33℃則需通風降溫。當猴頭菌蕾出現后，可將室溫降至18～28℃，但以20～23℃發育最好，現蕾最快。當菌蕾長至瘤狀突起時，即可在其頂上塑料薄膜處撕一小孔，或解開袋口，再將室溫降至16～18℃，此時管理應注意通風換氣，每日早、中、晚各打開門窗1次，每次通風約15～20分鐘。各階段對空氣相對濕度的要求差異較大，菌絲生長階段一般以10%～20%為最好；子實體生長階段則以90%～95%為宜。低于90%，生長緩慢，肉質低劣，子實體瘦小；低于90%，生長緩慢，肉質低劣，子實體瘦小；低于60%很難現蕾，即便出現幼蕾，也會很快干枯；高于95%以上，則易出現畸形蕾，多表現為松散分枝型，且易腐爛變質。猴頭菌喜光，需有一定的散射光條件下，在完全黑暗條件下，菌絲雖能生長，但很難形成子實體。因此在培養猴頭菌時必須保持室內明亮，最好有散射光，避免陽光直射。一般在猴頭子實體生長期間，要注重勤噴霧狀水以利提高產量。
　　秋季氣候涼爽，雨量充沛，空氣濕度較大，是栽培猴頭菌的最佳季節，其它季節應根據猴頭菌對環境條件的要求采取相應的措施，栽培才能成功。
　　5.采收
　　當子實體球塊長滿菌刺，菌刺長的約1cm左右，色澤白色，即可采收。采收時，以左手按袋，右手緊握子實體慢轉而下，注意菌柄不宜留茬過高，以免噴水后腐爛，招引雜菌及蟲害。