母種多用半合成培養基培養。母種的生產應有一個計劃，即預計某一時期內所用生產種的數量，從而確定母種生產的數量。母種第一代盡量多轉出斜面管，減少轉管的代次，避免造成菌絲生活力下降、出菇率低等現象。斜面管在攝氏4度冰箱可保存3個月，但最好在一個月內使用。加石蠟油的斜面在攝氏4度時保藏時間可長些。母種擴大生產前要經嚴格檢查是否污染病蟲害、標簽是否齊全，是否經過出菇試驗等全面考核才能進行擴大生產。第一次母種轉管，每管可轉出60-80管第二次母種。第二次母種一部分用于轉接原種使用，一部分保藏。同樣做法，一般母種經3-4次代轉傳為好。

　　斜面母種轉管方法：轉管過程應在無菌箱或無菌室進行。工作人員、工作環境、一切器材要經嚴格消毒或滅菌。接種前斜面試管用75%酒精抹擦，酒精燈旁用拿接種鏟的手的指間拔下棉塞向外夾著，火焰輕輕燒過管口才轉管，已滅菌后稍涼的接種鏟先在母種斜面上縱向切成2毫米寬的長條，再用接種鏟沿斜面的水平方向深約2-3毫米鏟離，然后用接種鋤將斜面橫向切成寬2毫米、長4毫米的小塊。用接種鏟把斜面前段約1厘米的部分除去，其余菌種逐一小塊接入空白斜面培養基內，菌種塊放在空白斜面的中部為好。把管口燒過，塞上棉塞。以上操作在無雜菌條件下進行，稱為無菌操作。離開酒精燈，寫上標簽。新接上的菌種立即進行適溫培養。當原菌絲塊的菌絲萌發新菌絲時，可將原來溫度調低攝氏2-3度，讓菌絲緩慢生長，會更強壯，更有生命力。至菌絲長滿斜面即為菌種成熟。