二、液體菌種生產的關鍵技術
1、溶氧量
液體菌種生產中最關鍵的是培養液中氧的溶解量,因為在菌絲生長過程中,必須不斷的吸收溶解其中的氧氣來維持自身的新陳代謝,氧氣在液體(水)中的溶解量與壓力、溫度有關,同時與培養液的接觸面積、滲透壓有很大的關系。 因此我們設計發酵設備時有效地解決了這些問題,如安裝射流器使氣泡細碎度增加等。
2、空氣過濾
技術的關鍵就是保證進入的空氣無菌度高,因此必須選擇孔徑小、材料先進的過濾膜。一般細菌直徑在0.5-5um,酵母菌在1-10um,病毒一般在20-400mu,所以選擇過濾膜時應綜合考慮以上因素。當然如果選的太小,成本將大幅度提高。另外環境對于空氣影響很大,在空氣壓縮機房、制種車間必須保持環境清潔。
3、培養液
培養液是菌絲生長發育的營養源,要求營養全面均衡。不同的菌種對營養要求偏重不同。配制原料有糖、麩皮、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素、蛋白胨、土豆汁、酵母浸膏等。配置培養液時,先將土豆片、麩皮一起煮熟,將汁液濾出,后加入其它輔料混勻即可。
4、接種
培養器上端有接種口,也是裝料口,將母種并瓶后加入抑菌劑,而后必須在火焰圈的保護下倒入罐體內,要求動作快、操作準確。
5、環境
如前所述,環境對菌種生產影響很大,過濾器本身不可能把雜菌百分之百地濾掉,減少環境中的雜菌基數是非常重要的,液體菌種母種接入到經滅菌的培養液中只要能形成對雜菌的生長優勢就可以抑制雜菌感染,也就是說,液體菌種培養不是建立在絕對無菌的前提下相反是建立在相對無菌的前提下。就此意義上說,保持環境清潔,減少空氣中雜菌基數,對于提高菌種培養成功率意義較大。
三、 液體菌種生產流程
工藝流程圖: 空氣壓縮→過濾
↓
配料→裝罐→滅菌→冷卻→接種→培養→液體種
↑
試管斜面種→ 三角瓶顆粒種
配料時先將土豆去皮切片,與麩皮混合后用不銹鋼鍋煮熟并取汁,在將輔料KH2PO4、MgSO4等溶入,混勻后裝入罐中加熱,至121.3℃并維持40分鐘左右進行滅菌,滅菌結束后用冷水冷卻至培養溫度,而后將并瓶后的三角瓶種接上進行培養,培養時根據不同的菌種,設定適宜的溫度。
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