林新堅; 江秀紅; 蔡海松; 鄭永標; 林陳強
福建省農業科學院土壤肥料研究所; 福建省農產品質量安全檢驗檢測中心; 福建省農業科學院土壤肥料研究所; 福建省農業科學院土壤肥料研究所; 福建省農業科學院土壤肥料研究所 福州350013; 福州350003; 福州350013; 福州350013; 福州350013

【中文摘要】 為了建立穩定的姬松茸(Agaricus blazei Murill)簡單序列重復區間(Inter-Simple Sequence Repeats,ISSR)分子標記技術體系,筆者通過單因子試驗分別研究了模板DNA、Mg2+濃度、dNTP、引物濃度和Taq酶用量對姬松茸ISSR-PCR擴增的影響,確定了姬松茸ISSR分析的最佳PCR條件為:25μL反應體系中,模板DNA20ng,引物0.75μmol/L,dNTP200μmol/L,Mg2+2.0mmol/L,Taq DNA polymerase 1.5U。并應用該優化體系篩選到6個適合姬松茸ISSR-PCR擴增的引物,為利用ISSR標記技術研究姬松茸的種質資源提供了參考。

【英文摘要】 Single factor testing was used to determine the optimal concentrations of DNA template,primer,dNTP,Mg2+ and Taq DNA polymerase for PCR amplification of inter-simple sequence repeats(ISSR)in order to establish a stable ISSR-based molecular marker system for Agaricus blazei Murrill.The reaction mixture for optimum amplification contained:20 ng DNA template,0.75 μmol/L primer,200 μmol/L dNTP,2.0 mmol/L Mg2+ and 1.5 U Taq DNA polymerase.Six primers suitable for PCR amplification of ISSR markers from A.blazei were selected using this system.Our data has important implications for A.blazei germplasm analysis.

【中文關鍵詞】 姬松茸; 簡單序列重復區間; 體系優化; 單因子試驗
【英文關鍵詞】 Agaricus blazei; Inter-simple sequence repeats(ISSR); System optimization; Single factor test
【基金】福建省科技廳項目“姬松茸低鎘品種選育”(編號2002I010);; 福建省財政專項“福建省農業科學科技創新團隊建設基金”(STIF-Y01)的部分研究內容

【文獻出處】 食用菌學報,Acta Edulis Fungi,編輯部郵箱,2007年04期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2007-04-007