【作者】王登杰 王海鴻 張桃 雷仲仁
【機構】中國農業科學院植物保護研究所植物病蟲害生物學國家重點實驗室
摘要：同一種蟲生真菌的不同菌株對于特定昆蟲宿主的毒力可存在顯著差異,真菌在昆蟲體內的生長能力不同可能是引起這種差異的原因之一。為了探討真菌在宿主體內的生長動力學與其毒力的關系,本研究用生測法測定了3株球孢白僵菌(GZGY‐1‐3、SCWJ‐2、WLMQ‐20)在高劑量(1×108孢子/m L)和低劑量(1×106孢子/m L)下對煙粉虱4齡若蟲的毒力,用實時熒光定量PCR技術對真菌在宿主體內的拷貝數進行了定量,用熒光顯微方法觀察了白僵菌侵染煙粉虱的過程。生物測定實驗結果顯示:不論在高劑量還是低劑量下,菌株GZGY‐1‐3殺死煙粉虱所需的時間最短(在高劑量和低劑量下LT50分別為2.29d和6.10d),其次是菌株SCWJ‐2(LT50分別為3.03d和7.38d),菌株WLMQ‐20所需時間最長(LT50分別為4.13d和9.39d)。對于同一菌株,其高劑量下的毒力顯著高于低劑量下的毒力。實時熒光定量PCR實驗顯示,接觸高劑量孢子后煙粉虱獲得的孢子數遠遠高于接觸低劑量時的孢子數。接種后,每一菌株和每一劑量下的真菌生長都表現出一個相似的模式。在接種24h后,真菌細胞數量顯著下降,在接種后24–48h之間是一個簡短的恢復階段,接種48–72h后是真菌的細胞數略有凈增長的穩定時期,在宿主死亡前后的階段,真菌數量急劇增加,與接種后最初24h相比高了近1 000倍。然而,盡管它們的生長模式相似,但是卻存在著量上的差異,由致病性強、劑量高的菌株侵染的昆蟲體內的最終真菌菌體數高。熒光顯微技術觀察到的白僵菌對煙粉虱的侵染過程證實了定量PCR的結果。這些結果說明菌株間毒力的差異在一定程度上是由真菌生長動力學的量化差異所決定的。
基金：公益性行業(農業)科研專項(201303019-02)； 國家現代農業產業技術體系建設專項資金(CARS-25-B-07)~~；
關鍵詞：球孢白僵菌; 煙粉虱; 生長動力學; 毒力; 定量PCR;