【作者】彭秀秀 柴一秋 朱碧純 金軼偉 厲曉臘 喻林升
【機構(gòu)】溫州醫(yī)科大學(xué) 浙江省亞熱帶作物研究所 溫州市蟲生真菌資源研究與開發(fā)重點實驗室
摘要：研究蟬花蟲草提取物N~6-(2-羥乙基)腺苷[N~6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA]對小鼠腎臟缺血再灌注損傷(ischemia reperfusion,IR)的影響。選擇20–25g雄性C57BL/6小鼠,隨機分成5組。假手術(shù)組小鼠僅接受腹中線開腹、游離雙側(cè)腎蒂及縫合腹部操作;IR組小鼠制成腎臟IR模型,不給藥;HEA低劑量組、HEA中劑量組、HEA高劑量組分別在建立腎臟缺血再灌注模型前15min腹腔注射HEA(2.5mg/kg、5mg/kg和7.5mg/kg)。再灌注24h后檢測各組腎功能指標(biāo)血清肌酐(serum creatinine,Scr)和尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平。蘇木精-伊紅染色后用光學(xué)顯微鏡觀察腎臟組織形態(tài)學(xué)改變。電鏡和TUNEL分析法觀察腎小管上皮細(xì)胞凋亡狀況。實時熒光定量RT-PCR檢測細(xì)胞間粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、白細(xì)胞介素(interleukin-1β,IL-1β)和腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等基因的m RNA的表達(dá)情況。結(jié)果顯示,與假手術(shù)組比較,IR組BUN和Scr水平明顯升高(P<0.01,P<0.05);腎臟病理表現(xiàn)為上皮細(xì)胞碎片和管型,且最為嚴(yán)重;與IR組比較,HEA 7.5mg/kg組血清BUN和Scr水平顯著降低(P<0.05);HEA 5mg/kg組和HEA 7.5mg/kg組腎損傷情況明顯改善(P<0.05,P<0.01);電鏡觀察可知HEA 7.5mg/kg組明顯改善腎小管上皮細(xì)胞的損傷程度,并且保護線粒體和細(xì)胞核膜的完整性。原位末端標(biāo)記法[terminal dexynucleotidyl transferase(Td T)-mediated d UTP nick end labeling,TUNEL]顯示HEA治療組凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯低于IR組(P<0.01)。HEA治療組ICAM-1、IL-1β和TNF-αm RNA的水平均低于IR組(P<0.01)。所以預(yù)處理HEA 7.5mg/kg對腎臟缺血再灌注有保護作用。
基金：浙江省重大優(yōu)先項目(2008C12044-3)； 浙江省自然科學(xué)基金(Y3100625)；
關(guān)鍵詞：N~6‐(2‐羥乙基)腺苷; 缺血再灌注損傷; 腎臟病理; 細(xì)胞凋亡; 促炎癥因子;
【機構(gòu)】溫州醫(yī)科大學(xué) 浙江省亞熱帶作物研究所 溫州市蟲生真菌資源研究與開發(fā)重點實驗室
摘要：研究蟬花蟲草提取物N~6-(2-羥乙基)腺苷[N~6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA]對小鼠腎臟缺血再灌注損傷(ischemia reperfusion,IR)的影響。選擇20–25g雄性C57BL/6小鼠,隨機分成5組。假手術(shù)組小鼠僅接受腹中線開腹、游離雙側(cè)腎蒂及縫合腹部操作;IR組小鼠制成腎臟IR模型,不給藥;HEA低劑量組、HEA中劑量組、HEA高劑量組分別在建立腎臟缺血再灌注模型前15min腹腔注射HEA(2.5mg/kg、5mg/kg和7.5mg/kg)。再灌注24h后檢測各組腎功能指標(biāo)血清肌酐(serum creatinine,Scr)和尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平。蘇木精-伊紅染色后用光學(xué)顯微鏡觀察腎臟組織形態(tài)學(xué)改變。電鏡和TUNEL分析法觀察腎小管上皮細(xì)胞凋亡狀況。實時熒光定量RT-PCR檢測細(xì)胞間粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、白細(xì)胞介素(interleukin-1β,IL-1β)和腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等基因的m RNA的表達(dá)情況。結(jié)果顯示,與假手術(shù)組比較,IR組BUN和Scr水平明顯升高(P<0.01,P<0.05);腎臟病理表現(xiàn)為上皮細(xì)胞碎片和管型,且最為嚴(yán)重;與IR組比較,HEA 7.5mg/kg組血清BUN和Scr水平顯著降低(P<0.05);HEA 5mg/kg組和HEA 7.5mg/kg組腎損傷情況明顯改善(P<0.05,P<0.01);電鏡觀察可知HEA 7.5mg/kg組明顯改善腎小管上皮細(xì)胞的損傷程度,并且保護線粒體和細(xì)胞核膜的完整性。原位末端標(biāo)記法[terminal dexynucleotidyl transferase(Td T)-mediated d UTP nick end labeling,TUNEL]顯示HEA治療組凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯低于IR組(P<0.01)。HEA治療組ICAM-1、IL-1β和TNF-αm RNA的水平均低于IR組(P<0.01)。所以預(yù)處理HEA 7.5mg/kg對腎臟缺血再灌注有保護作用。
基金：浙江省重大優(yōu)先項目(2008C12044-3)； 浙江省自然科學(xué)基金(Y3100625)；
關(guān)鍵詞：N~6‐(2‐羥乙基)腺苷; 缺血再灌注損傷; 腎臟病理; 細(xì)胞凋亡; 促炎癥因子;