【作者】陳珊珊 郝蕾蕾 周娜 李增智
【機(jī)構(gòu)】華安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物防治省重點(diǎn)實(shí)驗室
摘要：羧基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因是近年來分離出的新基因,在蟲生真菌中可能與穿透昆蟲體壁時的能量代謝有關(guān)。構(gòu)建了針對該基因的雙鏈RNA干擾載體,采用芽生孢子轉(zhuǎn)化法將載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)入球孢白僵菌,并通過RT-PCR檢測轉(zhuǎn)化前后BbJEN1的表達(dá)情況。RT-PCR檢測結(jié)果顯示,球孢白僵菌轉(zhuǎn)化子BbJEN1基因的表達(dá)水平顯著下降,表明干擾載體具有明顯的沉默效應(yīng)。在兩種培養(yǎng)基上,轉(zhuǎn)化子與原始菌株的生長速度和產(chǎn)孢量差異均不顯著,而分生孢子萌發(fā)則顯著滯后于原始菌株。使用馬尾松毛蟲幼蟲對轉(zhuǎn)化子和原始菌株進(jìn)行生物測定,原始菌株的半致死濃度、半致死劑量和半致死時間分別為2.79×106個孢子/mL、84.12個孢子/mm2和6.49d,而轉(zhuǎn)化子的半致死濃度、半致死劑量和半致死時間則分別增加到1.27×107個孢子/mL、382.92個孢子/mm2和8.09d,毒力顯著下降。由此表明BbJEN1基因與球孢白僵菌分生孢子發(fā)芽以及毒力均有關(guān)。
基金：“863”項目(No2006AA10A212)； 教育部高等學(xué)校博士點(diǎn)專項科研基金(No200503644001)；
關(guān)鍵詞：馬尾松毛蟲; 羧基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白; 基因沉默; 孢子發(fā)芽; 毒力;