【作者】喬娜 汪虹 陳明杰
【機構】南京農業大學生命科學學院 農業部應用真菌資源與利用重點開放實驗室 上海市食用菌工程技術研究中心 上海市農業遺傳育種重點實驗室 上海市農業科學院食用菌研究所
【摘要】將草菇菌株V23和耐低溫誘變草菇菌株VH3的菌絲在4℃下處理不同時間,分別提取RNA,反轉錄獲得cDNA作為模板,構建含Cor1基因和GPD內標基因片段的質粒作為標準品,采用熒光定量PCR技術研究Cor1基因在低溫下的表達變化。結果表明草菇V23菌株的Cor1基因未經低溫處理的表達量最大,低溫處理后表達量持續下降,在6h達到最低值,8h開始該基因的表達量上升;而VH3菌株Cor1基因低溫處理后表達量明顯增加,2h達到最大值,4h下降,但6h開始上升,10h又下降。通過推測Cor1基因表達與草菇耐低溫特性有相關性,為今后利用草菇自身的抗寒機制進行遺傳改造提供理論依據。
【基金】上海農科院2006年度青年科學基金“利用實時熒光定量PCR技術驗證草菇冷誘導基因的表達”; 上海市科技興農重點攻關項目“草菇低溫誘變菌株VH3配套栽培技術的研究”(滬農科攻字2007第6-2號); 農業部公益性行業科研專項項目(食用菌現代產業技術體系研究與建立)(No.nyhyzx07-008);
【關鍵詞】食用菌; 耐低溫誘變菌株; 雙標準曲線法; 定量PCR;
【機構】南京農業大學生命科學學院 農業部應用真菌資源與利用重點開放實驗室 上海市食用菌工程技術研究中心 上海市農業遺傳育種重點實驗室 上海市農業科學院食用菌研究所
【摘要】將草菇菌株V23和耐低溫誘變草菇菌株VH3的菌絲在4℃下處理不同時間,分別提取RNA,反轉錄獲得cDNA作為模板,構建含Cor1基因和GPD內標基因片段的質粒作為標準品,采用熒光定量PCR技術研究Cor1基因在低溫下的表達變化。結果表明草菇V23菌株的Cor1基因未經低溫處理的表達量最大,低溫處理后表達量持續下降,在6h達到最低值,8h開始該基因的表達量上升;而VH3菌株Cor1基因低溫處理后表達量明顯增加,2h達到最大值,4h下降,但6h開始上升,10h又下降。通過推測Cor1基因表達與草菇耐低溫特性有相關性,為今后利用草菇自身的抗寒機制進行遺傳改造提供理論依據。
【基金】上海農科院2006年度青年科學基金“利用實時熒光定量PCR技術驗證草菇冷誘導基因的表達”; 上海市科技興農重點攻關項目“草菇低溫誘變菌株VH3配套栽培技術的研究”(滬農科攻字2007第6-2號); 農業部公益性行業科研專項項目(食用菌現代產業技術體系研究與建立)(No.nyhyzx07-008);
【關鍵詞】食用菌; 耐低溫誘變菌株; 雙標準曲線法; 定量PCR;