【書摘】
4．菌種制備
(1)接種場所的消毒
菌種制備的過程需要在預先消毒過的接種箱或接種室內進行。消毒就是采用物理或化學的方法將有害微生物殺死，一般采用的方法有藥物熏蒸、藥液噴霧或紫外線照射，若三者并用，效果更佳。
接種箱的消毒 接種箱多用于分離菌種和小規模的接種。
使用前先用0．25%新潔爾滅溶液將箱內揩擦干凈，然后用甲醛熏蒸消毒。一般每立方米空間需用40%甲醛溶液8毫升和高錳酸鉀5克氣化熏蒸。熏蒸時將接種工具、器皿放人箱內，把稱好的高錳酸鉀放人罐頭瓶內，再將甲醛倒人，迅速關好接種箱，二者反應產生的熱量將甲醛變為蒸氣而充斥整個箱體，就這樣密閉8~12小時。工作前再用紫外線燈照射20～30分鐘，以達到空間殺菌的目的。照射結束后，隔30分鐘就可以開始工作。
如果接種箱只用于少量的接種工作，則在使用前30分鐘。噴一次5%石炭酸液，并同時用紫外線照射20—30分鐘就可以了。因為接種時試管口還有酒精燈火焰封口這一關，一般被污染雜菌的可能性不大。
接種室的消毒 接種室空間較大，使用前一天必需進行熏蒸消毒殺菌，方法同接種箱的消毒。由于甲醛對人的眼、鼻有強烈的刺激作用，可在熏蒸后12小時，量取與甲醛液等量的氨水，倒人容器迅速放人室內與甲醛中和，可以減少甲醛的刺激作用，該工作至少在接種前2小時進行。每次接種前，常用5%石炭酸溶液噴霧，用以殺菌和沉降空氣中的微粒及雜菌孢子，使室內空氣凈化。之后，打開紫外燈照射l小時。照射結束后，隔30分鐘再人室作業。若連續使用
接種室，必須重新進行全面消毒。
(2)接種方法
原種的接種 接種箱消毒之后，就可以開始接種。操作之前要將手洗干凈，再用75%酒精棉球擦手。操作時，左手拿起試管，右手拿接種針，將接種針放在酒精燈火焰上灼燒。冷卻后，在酒精燈火焰附近拔開試管棉塞，試管口向下傾斜，用酒精燈火焰封口。接著把接種針伸人斜面菌種的試管內，鉤取一小塊帶培養基的菌種塊，在菌種塊出入試管口時不要接觸管壁或管口，也不要過火焰，以防燙死或燒傷菌種。迅速把菌種塊移人試管培養基的中部，把棉塞頭的四周在火焰上燒一下，然后立即將棉塞塞人試管口。塞人后將棉塞旋轉一兩下，使之與管壁緊貼(圖3．17)。根據斜面的大小，每支斜面菌種可擴大移植20～50支。轉管繁殖的次數不宜過多，否則菌絲老化，菌種質量下降，給生產帶來不利。接好試管放人恒溫箱避光培養。
對于分離得到的原種。必須進行純化。純化方法是在菌落的邊緣挑取先端菌絲體，移植到試管斜面培養基上在適溫下培養。如此移植2～3次就達到了純化的目的。
母種的接種 制作母種的目的，就是將優質的原種進一步擴大繁殖，增加菌種的數量以滿足制栽培種的需要。接種的要求和基本操作與原種接種相同。母種的培養基多用鋸木屑、棉籽殼、農作物秸稈、谷粒等物質，盛裝容器多用菌種瓶、罐頭瓶或塑料袋，經高壓滅菌后，必須先冷卻再接種，一般一支原種可接4～6瓶母種(圖3—18)。接好的母種貼上標簽放人培養室避光培養，一般經30～45天，菌絲即可長滿瓶。銀耳母種的菌齡應控制在15天左右。
