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    簡便高質量的食用菌總RNA提取方法


    【發布日期】:2010-05-17

    稅丕容; 鄭曉冰; 林俊芳; 郭麗瓊
    華南農業大學食品學院生物工程系; 華南農業大學食品學院生物工程系; 華南農業大學食品學院生物工程系; 華南農業大學食品學院生物工程系 廣東廣州510640; 廣東廣州510640; 廣東廣州510640; 廣東廣州510640

    【中文摘要】 STE法是針對食用菌多糖含量高而設計的一種提取食用菌總RNA的有效方法。本研究以靈芝、香菇和白腐真菌TR16菌株的菌絲體為材料,采用STE法提取其總RNA,同時以Trizol法作對照。結果表明:采用STE法提取的三種菌絲的總RNAA260/A280比值在1.80~2.10范圍內,A260/A230略大于2.00;而Trizol法提取的總RNAA260/A280比值小于1.80,A260/A230小于1.90,明顯比STE法效果差;總RNA電泳檢測表明:STE法的3條帶(28SrRNA、18SrRNA和5SrRNA)清晰,無拖尾,無雜帶,效果比Trizol法好;將STE法提取的總RNA進行反轉錄后合成雙鏈cDNA,進行預擴增,電泳顯示呈彌散狀;再進行選擇性擴增,有相同或相異的條帶。進一步表明STE法提取的總RNA質量較高,可以滿足后續分子生物學研究的要求。

    【中文關鍵詞】 食用菌; 總RNA; STE法
    【基金】國家自然科學基金(編號:30671457,30371000);; 廣東省自然科學基金(編號:5006680,032239)的部分研究內容

    【文獻出處】 食用菌學報,Acta Edulis Fungi,編輯部郵箱,2008年01期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2008-01-009

     
     
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