【作者】陳銘 耿志剛 劉寧 李多川
【機構】山東農業大學植物保護學院菌物學系
摘要：多糖單加氧酶(Polysaccharide monooxygenases,PMOs)是一類含銅氧化酶,在還原型輔因子(如維生素C)存在下可使纖維素分子氧化降解,在纖維素的酶解中起重要作用。本研究克隆5個嗜熱真菌PMOs基因,構建p PICZαA-PMO表達載體,電轉畢赤酵母GS115進行真核表達,經鎳柱純化獲得重組蛋白后對其氧化活性進行探究。用5個PMOs分別處理磷酸膨脹纖維素(PASC),薄層層析法(TLC)鑒定酶解產物主要為纖維二糖到纖維六糖;飛行時間質譜法(MALDI-TOF-MS)鑒定結果顯示:PMO0810為C4或C6氧化,PMO2033、PMO0154、PMO4983既有C1氧化也有C4或C6氧化,PMO3424未檢測到相應的氧化裂解峰。
基金：國家高技術研究發展計劃(2012AA10180402)； 國家科技支撐計劃(2015BAD15B05)； 國家自然科學基金(31571949)~~；
關鍵詞：多糖單加氧酶; 嗜熱真菌; 氧化裂解; 飛行時間質譜;