【作者】王龍 莊文穎
【機構】中國科學院微生物研究所真菌地衣系統學重點實驗室,中國科學院微生物研究所真菌地衣系統學重點實驗室 北京100080中國科學院研究生院,北京100080
【摘要】在本研究中,基于某些模型生物的鈣調蛋白氨基酸序列及其基因序列,一套用于擴增其部分區域的PCR引物被設計出來。為了與傳統分類方法相整合,基因組DNA的提取及擴增的方法均得到了改進和優化。用這套引物和方法,在青霉的鈣調蛋白基因中從編碼第9個氨基酸---谷氨酰胺(Gln)的密碼子的第3個核苷酸到編碼第122個氨基酸---纈氨酸(Val)的密碼子的第3個核苷酸被成功擴增出來。這個區段包含了青霉鈣調蛋白基因第2和第5外元(exon)的部分序列和全部三個內元 (intron) 序列約600bp左右,可直接進行雙向直通測序,非常適用于青霉的種系學研究。
【關鍵詞】DNA提取; PCR; 種系學; 正青霉; 籃狀菌; 青霉菌;