【作者】王景琳；張志東；李忠潤；顧良媛；尹世興；

【機構】中國農業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所；中國農業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所 蘭州 730046；

【摘要】采用蛋白質連接技術合成玉米赤霉烯酮抗原,免疫Balb/c鼠,通過淋巴細胞雜交瘤技術建立六株分泌抗玉米赤霉烯酮的單克隆抗體雜交瘤細胞株。間接酶聯(lián)免疫吸附試驗測定細胞上清抗體效價為1:2084(4H8)、1:256(6H9、4H3、2H5、2C8)、1:16(3F10);腹水抗體效價為10~9(4H3、4H8)、10~8(2H5)、10~7(6H9)、10~5(3H10)。競爭間接酶聯(lián)免疫吸附試驗測定六株單克隆抗體對玉米赤霉烯酮的敏感度為0.3—0.8ng/ml。六株抗體與玉米亦霉烯醇的交叉反應率為1.3—9.0％。六株單克隆抗體均屬IgG類。細胞體外傳代培養(yǎng)和凍存復蘇后分泌抗體穩(wěn)定。純化抗體在37℃保存12天穩(wěn)定,-30℃保存90天抗體滴度不變。用該抗體建立競爭間接酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測摻合玉米赤霉烯酮的玉米、小麥、飼料,平均回收率分別為105％、90％、103％,平均批間變異系數(shù)為5.8％、2.8％、6.8％,批內變異系數(shù)為3.8％、12.7％、15.7％。樣品中玉米赤霉烯酮摻合量與競爭間接酶聯(lián)免疫吸附試驗檢出量有良好相關性(r≥0.9996)。 

【關鍵詞】玉米赤霉烯酮；單克隆抗體；免疫分析；

【基金】國家自然科學基金；

【分類號】Q946；